PiggyBac系統(tǒng)包含兩個載體，一個載體被稱為輔助質(zhì)粒，負責編碼轉(zhuǎn)座酶；另一個載體被稱為轉(zhuǎn)座子質(zhì)粒，包含兩個反向末端重復(fù)序列（ITRs）以及兩者之間的被轉(zhuǎn)座區(qū)域，需要被轉(zhuǎn)座到宿主基因組中的目的基因（或其他片段）就克隆在這個區(qū)域。

當輔助質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座子質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染靶細胞時，輔助質(zhì)粒產(chǎn)生的轉(zhuǎn)座酶將會識別轉(zhuǎn)座子的兩個ITR元件，然后將被轉(zhuǎn)座區(qū)和兩個ITR元件插入到宿主基因組中。轉(zhuǎn)座插入通常發(fā)生在包含TTAA序列的宿主染色體位點，并在轉(zhuǎn)座子兩側(cè)出現(xiàn)TTAA重復(fù)序列。

在細胞培養(yǎng)體系中使用piggyBac載體系統(tǒng)相對簡單，可以連續(xù)轉(zhuǎn)染或共轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)座子和輔助質(zhì)粒，也可以使用電轉(zhuǎn)的方法代替化學轉(zhuǎn)染。

然而，在活體動物中，化學轉(zhuǎn)染和電轉(zhuǎn)介導(dǎo)的質(zhì)粒共轉(zhuǎn)效率都較低。一些研究人員則分開制作表達轉(zhuǎn)座子和轉(zhuǎn)座酶的轉(zhuǎn)基因動物，然后將兩個轉(zhuǎn)基因動物進行雜交；或是將單獨的質(zhì)粒轉(zhuǎn)到表達轉(zhuǎn)座子或轉(zhuǎn)座酶的轉(zhuǎn)基因動物中以誘導(dǎo)轉(zhuǎn)座子發(fā)生轉(zhuǎn)座（如Ding et al. Cell. 122:473-83；Horn et el. Genetics. 163:647-61）。

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