云舟生物的過表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株可幫您克服基因瞬時(shí)轉(zhuǎn)染效率的不穩(wěn)定性。我們的基因過表達(dá)細(xì)胞采用慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)以及抗性篩選方法制備。目的基因表達(dá)水平采用RT-qPCR方法驗(yàn)證。此外，我們還會對每批細(xì)胞株產(chǎn)品進(jìn)行一系列QC檢驗(yàn)，如無菌檢測、支原體檢測等。根據(jù)您的需求，我們還可提供其它檢測方項(xiàng)目，如WB、免疫組化試驗(yàn)等。
亮點(diǎn)：
- 轉(zhuǎn)基因永久整合：慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因整合宿主細(xì)胞基因組，細(xì)胞傳代多次后仍具有穩(wěn)定的表達(dá)效果。
- 可轉(zhuǎn)導(dǎo)多種靶細(xì)胞：基因轉(zhuǎn)導(dǎo)采用的慢病毒的包膜蛋白為VSV-G，具備感染多種類型的哺乳動物細(xì)胞的能力。
- 周期短：載體設(shè)計(jì)完成后的細(xì)胞從改造到交付，快至9周。
服務(wù)詳情
圖1 基因過表達(dá)穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的構(gòu)建流程。
訂購信息
| 服務(wù) | 交付內(nèi)容 | 價(jià)格(CNY) | 周期 |
|---|
| 基因過表達(dá)細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建 | 多克隆細(xì)胞群（>106個(gè)細(xì)胞/管, 2管） | ￥13,980起 | 8-11周 |
| 兩個(gè)單克隆細(xì)胞株（>106個(gè)細(xì)胞/管, 每個(gè)克隆各2管） | ￥18,980起 | 13-16周 |
* 增加交付克隆數(shù)將收取額外費(fèi)用。
QC試驗(yàn)
| 試驗(yàn)項(xiàng)目 | 方法 |
| 基因過表達(dá)驗(yàn)證（默認(rèn)） | RT-qPCR |
| 表達(dá)測試（額外收費(fèi)） | WB、IF、FACS |
| 無菌測試（默認(rèn)） | 支原體檢測、生物負(fù)荷檢測等 |
下游服務(wù)
對于您的細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株，我們可以開展多種類型的表型分析和功能驗(yàn)證，保括細(xì)胞增殖、凋亡、遷移、細(xì)胞活力、細(xì)胞毒性等。
案例分析
圖2 基因過表達(dá)細(xì)胞穩(wěn)轉(zhuǎn)株的表達(dá)驗(yàn)證。（A）在ID8、CHO-K1、HEK293細(xì)胞中分別過表達(dá)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的MSLN、B7-H3、以及CD19，流式細(xì)胞術(shù)分析。（B）WB分析Caco-2細(xì)胞的蛋白表達(dá)水平。（C）熒光素酶試驗(yàn)檢測MCF7細(xì)胞中過表達(dá)的熒光素酶報(bào)告基因。（D）表達(dá)熒光素酶報(bào)告基因的Renca細(xì)胞源性異種移植小鼠模型，體內(nèi)成像追蹤腫瘤遷移。
常見問題解答
| 方法 | 優(yōu)勢 | 不足 |
| 基因過表達(dá) | 慢病毒 | 技術(shù)簡單 | 隨機(jī)插入 |
| 基因敲入 | CRISPR（RNP電轉(zhuǎn)） | 靶向整合 | 需要轉(zhuǎn)導(dǎo)多種組分 |
| 優(yōu)勢 | 不足 |
| 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo) | 轉(zhuǎn)基因整合宿主細(xì)胞基因組、轉(zhuǎn)基因永久表達(dá)、較容易轉(zhuǎn)導(dǎo)靶細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo) | 低裝載量（最高6.7 kb） |
| 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染 | 裝載量上限高（可達(dá)27 kb） | 瞬時(shí)表達(dá)、傳代后質(zhì)粒濃度降低、需要電轉(zhuǎn)或其它轉(zhuǎn)染方式 |
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