常見問題
藥物篩選標記 熒光蛋白 基因組編輯 蛋白表達 shRNA 病毒包裝 其他
VectorBuilder提供了多種藥物篩選標記,如嘌呤霉素(Puro),新霉素(Neo),潮霉素B(Hygro B)和殺稻瘟菌素(Bsd)。Puro比其他抗生素能更快、更均一地殺死非抗性細胞。因此,對大多數(shù)細胞而言,我們推薦使用Puro。然而,某些細胞會天然地對某些抗生素具有某種程度的抗性,或者即便含有抗性基因,一些細胞對某些抗生素也十分敏感。這時就需要對細胞進行不同的抗藥篩選測試以找到最合適的標記類型和濃度。
常用抗生素工作濃度和藥篩時間
抗生素 | 測試細胞 | 推薦工作濃度 | 推薦藥篩時間 |
Puromycin | 293T | 1-2 ug/ml | 3-5 天 |
Geneticin (G418) | HT1080 | 500-1000 ug/ml | 7-11 天 |
Blasticidin | 293T | 5-15 ug/ml | 7-11 天 |
Hygromycin B | 293T | 100-200 ug/ml | 5-7 天 |
注意:
a. G418應用于Neomycin抗性基因篩選
b. 傳代細胞可加快Blasticidin篩選