載體優(yōu)化

作為載體克隆及病毒包裝服務(wù)的全球領(lǐng)先供應(yīng)商，我們的團(tuán)隊(duì)已在載體學(xué)及病毒學(xué)方面累積了廣泛且豐富的背景知識(shí)，由此我們有能力為其在基礎(chǔ)研究及基因治療應(yīng)用方向上提供載體設(shè)計(jì)優(yōu)化的服務(wù)。我們已經(jīng)為客戶設(shè)計(jì)并交付了眾多不同的載體，已驗(yàn)證有效可用，安全可接受。我們每年為全球客戶設(shè)計(jì)及交付超30,000個(gè)的定制載體以及超10,000個(gè)以上的病毒，可進(jìn)行體外測(cè)試或體內(nèi)驗(yàn)證。另外，我們?cè)贐AC和YAC的重組構(gòu)建上也掌握了專業(yè)技術(shù)，由此我們也可以進(jìn)行非病毒載體的大型病毒基因組構(gòu)建開(kāi)發(fā)。利用高度復(fù)雜的文庫(kù)構(gòu)建技術(shù)以及NGS測(cè)試篩選，我們可以為載體設(shè)計(jì)優(yōu)化提供大規(guī)模的篩選平臺(tái)。我們的優(yōu)勢(shì)：

• 豐富多樣的已驗(yàn)證載體元件

  載體骨架、啟動(dòng)子（廣泛性、組織特異性、誘導(dǎo)性、人工合成）、ORF、連接子、蛋白標(biāo)簽以及shRNA和CRISPR靶點(diǎn)庫(kù)等

• 大規(guī)模篩選平臺(tái)

  組織特異性啟動(dòng)子/增強(qiáng)子篩選、衣殼蛋白進(jìn)化、shRNA篩選、CRISPR篩選、Rep/Cap啟動(dòng)子優(yōu)化、CAR抗體篩選等

• 病毒基因組構(gòu)建

  新型病毒載體的體外構(gòu)建。利用BAC和YAC重組技術(shù)構(gòu)建如冠狀病毒和單純性皰疹病毒（HSV）等大型基因組病毒

上游工藝開(kāi)發(fā)

我們?cè)谫|(zhì)粒DNA和病毒載體上游工藝開(kāi)發(fā)的項(xiàng)目包括：

• 細(xì)胞系開(kāi)發(fā)

  細(xì)菌、哺乳類細(xì)胞系、昆蟲(chóng)細(xì)胞系

• 細(xì)菌發(fā)酵培養(yǎng)規(guī)?；蛿U(kuò)展化

  發(fā)酵系統(tǒng)目前最大可支持100 L體積的攪拌培養(yǎng)

• 哺乳類細(xì)胞系和昆蟲(chóng)細(xì)胞系培養(yǎng)規(guī)?；驍U(kuò)展化
  • 貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)：培養(yǎng)瓶、10層細(xì)胞工廠、固定床生物反應(yīng)器（iCELLis Nano & 500, Univercells Technologies scale-X & NevoLine Upstream）等
  • 懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)：搖瓶、波浪式生物反應(yīng)器（最高50 L）、一次性生物反應(yīng)器（最高200 L）
• 培養(yǎng)基篩選及優(yōu)化

  無(wú)抗生素、無(wú)血清、無(wú)動(dòng)物源、化學(xué)合成等培養(yǎng)基

• 高密度細(xì)胞培養(yǎng)體系優(yōu)化

  細(xì)菌、哺乳類細(xì)胞系、昆蟲(chóng)細(xì)胞系

• 轉(zhuǎn)染/感染體系優(yōu)化

  Rep/Cap和輔助質(zhì)粒優(yōu)化、質(zhì)粒DNA比例、轉(zhuǎn)染試劑、感染MOI、細(xì)胞密度等

下游工藝開(kāi)發(fā)

載體下游工藝開(kāi)發(fā)的項(xiàng)目包括：

• 收獲和裂解工藝優(yōu)化

  收獲時(shí)間、細(xì)胞裂解方法、核酸酶處理方法等

• 純化工藝優(yōu)化
  • 柱層析工藝：分子篩、離子交換柱、親和柱以及混合柱處理方式等
  • 梯度離心工藝：蔗糖、氯化銫以及碘克沙醇
• 澄清，濃縮和緩沖液置換

  UF/DF（超濾/滲濾）方式（切向流、中空纖維柱、深層過(guò)濾）