質控分析

• 一般要求/物理特性

  外觀、濃度、pH值、可抽取體積、滲透壓、分散性

• 特性鑒定

  酶切鑒定、測序、瓊脂糖凝膠電泳、SDS-PAGE電泳、免疫檢測

• 單位含量/效價鑒定
  • 物理滴度：qPCR、ddPCR、免疫檢測、OD260/280
  • 感染活性滴度：噬斑法、TCID50法
  • 基因導入表達：轉導測試、Western blot、RT-qPCR、流式細胞術
• 純度
  • 成品相關
    • 完整病毒與空殼病毒比率：TEM
    • 質粒超螺旋比率：瓊脂糖凝膠電泳、HPLC
  • 宿主細胞相關
    • 宿主細胞蛋白：免疫檢測、SDS-PAGE電泳、銀染法、Micro-BCA、BCA、HPLC
    • 宿主細胞DNA：qPCR、瓊脂糖凝膠電泳
    • 宿主細胞RNA：瓊脂糖凝膠電泳、RT-PCR、熒光定量分析
  • 工藝相關
    • 質粒DNA殘留：qPCR
    • 核酸酶殘留：免疫檢測
    • BSA殘留：免疫檢測
    • PEI殘留：HPLC
    • 抗生素殘留：免疫檢測
• 安全性
  • 無菌性檢測：直接接種法、薄膜過濾法
  • 內毒素：動態(tài)顯色法（KCA）
  • 支原體：qPCR法、直接培養(yǎng)法、指示細胞法
  • 復制型病毒檢測（RCV）：qPCR、免疫檢測、Southern blotting
  • 外源病毒檢測：qPCR、體外細胞培養(yǎng)檢測
  • 病毒致癌基因（如E1A和SV40）檢測：qPCR

穩(wěn)定性研究

穩(wěn)定性研究目的是確保原料藥或制劑（DS/DP）在保質期內維持穩(wěn)定的質量。我們嚴格地按照ICH指南來評估基因治療載體在不同正常預設或強制降解的環(huán)境條件下（如pH，溫度，光線）對其效價及安全性的影響。