使用病毒載體直接轉(zhuǎn)染細胞（而不是用活病毒）可以促進靶基因（GOI）的表達，但是會存在一些問題（見下文）。因此，我們建議將病毒載體包裝成病毒使用，而不是直接轉(zhuǎn)導細胞。

病毒轉(zhuǎn)導通?？梢员荣|(zhì)粒轉(zhuǎn)染能更有效地將DNA傳遞到靶細胞中。當使用逆轉(zhuǎn)錄病毒如慢病毒或MMLV時，病毒基因組可以整合到宿主細胞基因組，使得攜帶在病毒上的基因可以穩(wěn)定表達。相反，轉(zhuǎn)染的載體質(zhì)粒DNA僅在細胞中瞬時表達。與低MOI病毒轉(zhuǎn)導相比，質(zhì)粒的直接轉(zhuǎn)染通常會使細胞中DNA的拷貝數(shù)非常高，以致載體上攜帶的基因高水平表達。然而，這種方式是非常不均一的（一些細胞包含許多拷貝，而一些細胞只有很少或沒有）。

我們的慢病毒載體5' LTR內(nèi)含有強的RSV啟動子，該啟動子可用于在病毒包裝過程中驅(qū)動病毒RNA基因組的轉(zhuǎn)錄。使用包裝好的慢病毒轉(zhuǎn)導細胞后，5' LTR的啟動子活性失活，因此它不會影響兩個LTR之間靶基因（GOI）的表達。然而，如果病毒載體直接轉(zhuǎn)染細胞，5' LTR啟動子將保持活性，這可能會導致許多不良效應，包括激活、扭曲或抑制慢病毒載體中下游基因的表達。

另外，由于病毒生產(chǎn)必需元件的存在，病毒載體大小通常大于包含相同表達盒的常規(guī)質(zhì)粒。隨著質(zhì)粒大小的增加，DNA制備和質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的效率都會下降。當直接進行質(zhì)粒轉(zhuǎn)染時，可能會導致轉(zhuǎn)染效率變得非常低下，特別是大于30 kb的腺病毒載體。

我們建議您使用VectorBuilder提供的病毒包裝服務。VectorBuilder研發(fā)出了一系列專利技術(shù)和試劑，為您提供更低價格、更短周期、高質(zhì)量、高滴度的病毒。

了解更多病毒包裝服務信息