腺病毒載體（Adenovirus）能夠攜帶大片段外源DNA、感染分裂細胞和非分裂細胞、誘導(dǎo)體液和細胞免疫應(yīng)答（這對于疫苗開發(fā)是有益的）、表現(xiàn)出高效率的轉(zhuǎn)導(dǎo)和高水平的轉(zhuǎn)基因表達、不整合細胞DNA（在細胞內(nèi)保持dsDNA游離體）。這些特性使腺病毒作為用于基因治療的轉(zhuǎn)基因載體、疫苗載體和溶瘤病毒療法中使用的載體。我們開發(fā)出一系列專有技術(shù)和試劑，從病毒滴度、純度、活性以及一致性等方面顯著提升了腺病毒包裝工藝水平。
訂購信息
| 生產(chǎn)規(guī)格 | 總量 | 最小滴度 | 分裝 | 價格（CNY） | 周期 |
| 腺病毒?量制備 | >2.5x109 IFU | >1010 IFU/ml | 10x25 ul | ￥4,680.00 | 28-35天 |
| 腺病毒中量制備 | >1010 IFU | >1010 IFU/ml | 10x100 ul | ￥7,780.00 |
| 腺病毒大量制備 | >1011 IFU | >1011 IFU/ml | 10x100 ul | ￥11,880.00 |
| 超純化腺病毒中量制備 | >5x1011 VP | >1012 VP/ml | 10x50 ul | ￥14,680.00 |
| 超純化腺病毒?量制備 | >1012 VP | >1012 VP/ml | 10x100 ul | ￥17,580.00 |
| 生產(chǎn)規(guī)格 | 總量 | 最小滴度 | 分裝 | 價格（CNY） | 周期 |
| 腺病毒?量制備 | >2.5x109 IFU | >1010 IFU/ml | 10x25 ul | ￥7,780.00 | 35-42天 |
| 腺病毒中量制備 | >1010 IFU | >1010 IFU/ml | 10x100 ul | ￥11,880.00 |
| 腺病毒大量制備 | >1011 IFU | >1011 IFU/ml | 10x100 ul | ￥17,880.00 |
| 超純化腺病毒中量制備 | >5x1011 VP | >1012 VP/ml | 10x50 ul | ￥22,080.00 |
| 超純化腺病毒?量制備 | >1012 VP | >1012 VP/ml | 10x100 ul | ￥26,380.00 |
| 生產(chǎn)規(guī)格 | 應(yīng)用 | 最小滴度 | 分裝 | 價格 (CNY) | 周期 |
|---|
| 超純化病毒中量制備 | 細胞培養(yǎng)和體內(nèi)應(yīng)用 | >1011 VP/ml | 10x50 ul | ￥ 27,980 | 44-62天 |
| 超純化病毒大量制備 | >1011 VP/ml | 10x100 ul | ¥ 34,980 | 44-62天 |
定制病毒，按照定制規(guī)格交付
對照病毒，按照定制病毒的規(guī)格對應(yīng)選購
- 超純化病毒大量制備: >1011 VP/ml 10×100 ul
服務(wù)詳情
服務(wù)類型
我們提供第一代腺病毒（E1/E3-deleted Ad5）、嵌合型腺病毒（Chimeric adenovirus）、以及Gutless腺病毒包裝服務(wù)。Ad5病毒的感染是通過病毒顆粒表面的纖突（Fiber）與細胞表面受體CAR（Coxsackie virus and adenovirus receptor）特異性結(jié)合而介導(dǎo)的。 并不是所有細胞都高表達CAR，Ad5病毒在某些不表達或者低表達CAR的細胞種類上的應(yīng)用受限。我們開發(fā)了嵌合型腺病毒，它的感染是通過嵌合型纖突（Chimeric fiber）與細胞表面分子CD46特異性結(jié)合而介導(dǎo)的。
交付內(nèi)容
| 非純化腺病毒制備服務(wù) | 純化腺病毒制備服務(wù) |
| 交付內(nèi)容 | 定制病毒，按照規(guī)格交付： - ?量制備：>1010IFU/ml，10x25 ul
- 中量制備：>1010IFU/ml，10x100 ul
- ?量制備：>1011IFU/ml，10x100 ul
| 定制病毒，按照規(guī)格交付： - ?量制備：>1012VP/ml，10x100 ul
|
對照病毒，按照定制病毒的規(guī)格對應(yīng)贈送： - ?量制備：>1010IFU/ml，100 ul
- 中量制備：>1010IFU/ml，2x100 ul
- ?量制備：>1010IFU/ml，2x100 ul
| 對照病毒，按照定制病毒的規(guī)格對應(yīng)選購： - ?量制備：>1012VP/ml，10x100 ul
|
輔助病毒，按照定制病毒的規(guī)格對應(yīng)選購： - ?量制備：>1010IFU/ml，10x25 ul
- 中量制備：>1010IFU/ml，10x100 ul
- ?量制備：>1011IFU/ml，10x100 ul
| 輔助病毒，按照定制病毒的規(guī)格對應(yīng)選購： - ?量制備：>1012VP/ml，10x100 ul
|
| 病毒重懸液 | HBSS緩沖液 | GTS緩沖液 |
| 運輸/存儲 | 干冰/-80°C，避免反復(fù)凍融 | 干冰/-80°C，避免反復(fù)凍融 |
| 推薦應(yīng)用 | 體外培養(yǎng)細胞轉(zhuǎn)導(dǎo) | 動物體內(nèi)細胞轉(zhuǎn)導(dǎo) |
對照病毒
為了更好地開展您的實驗，我們按照“對照病毒與定制病毒的生物學(xué)應(yīng)用相匹配”的原則給您贈送或者推薦對照病毒。例如，如果定制病毒表達一個基因，則推薦的對照病毒表達熒光蛋白EGFP。如果定制病毒表達打靶某個基因的shRNA，則對照病毒表達一個Scramble shRNA。推薦的對照病毒信息如下表所示：
| 對照病毒 | 對照載體名稱 | 對照載體ID | 定制病毒 |
| EGFP對照腺病毒，CMV啟動子 | pAV[Exp]-CMV>EGFP | VB010000-9299hac | 哺乳動物基因表達腺病毒（包含F(xiàn)LEX條件性表達）、哺乳動物腺病毒CRISPR系統(tǒng)、哺乳動物非編碼RNA表達腺病毒 |
| EGFP對照腺病毒，EF1A啟動子（選購） | pAV[Exp]-EF1A>EGFP |
VB900088-2235wrm |
| mCherry對照腺病毒，CMV啟動子（選購） | pAV[Exp]-CMV>mCherry | VB010000-9300kfr |
| mCherry對照腺病毒，EF1A啟動子（選購） | pAV[Exp]-EF1A>mCherry | VB010000-9408agb |
| Scramble shRNA對照腺病毒，EGFP熒光 | pAV[shRNA]-EGFP-U6>Scramble_shRNA | VB010000-0020ytx | 哺乳動物shRNA干擾腺病毒 |
| Scramble shRNA對照腺病毒，mCherry熒光 | pAV[shRNA]-CMV>mCherry-U6>Scramble_shRNA | VB010000-0021kwc |
| Scramble miR30-shRNA對照腺病毒，EGFP熒光 | pAV[miR30]-CMV>EGFP:Scramble_miR30-shRNA:WPRE | VB010000-9350dnk | 哺乳動物miR30-shRNA干擾腺病毒 |
| FLEX-EGFP對照腺病毒（選購） | pAV[FLEX_on]-CMV>rev(EGFP) | VB010000-9327vmy | 哺乳動物基因FLEX條件性表達腺病毒 |
輔助病毒
為了更好地開展您的實驗，我們按照“輔助病毒與定制病毒的生物學(xué)應(yīng)用相匹配”的原則給您推薦輔助病毒。例如，如果定制化的病毒是一個gRNA腺病毒（只表達gRNA），則需要一個表達Cas9的輔助病毒，才能進行CRISPR編輯實驗。推薦的輔助病毒信息如下表所示：
| 輔助病毒 | 輔助載體名稱 | 輔助載體ID | 定制病毒 |
| Cas9 腺病毒（選購） | pAV[Exp]-CMV>hCas9 | VB010000-9381pwj | 哺乳動物gRNA 腺病毒（不含Cas9） |
| Cre腺病毒（選購） | pAV[Exp]-CMV>Cre | VB010000-9374azh | 哺乳動物基因FLEX條件性表達腺病毒 |
運輸/儲存
我們的非純化腺病毒存儲于HBSS緩沖液，純化腺病毒存儲于GTS緩沖液中，并采用干冰運輸。收到腺病毒后，立即放置于-80°C，可保存約一年。若放置于-20°C，則可保存2-3周。融解后的腺病毒可在4°C保存1-2周。雖然腺病毒比其他多數(shù)病毒穩(wěn)定（如慢病毒），但是也請避免反復(fù)凍融，因為這會導(dǎo)致腺病毒滴度顯著下降。
生產(chǎn)/質(zhì)控
| 步驟 | 描述 | 時間 |
Plasmid linearization and Transfection | 我們常規(guī)使用的第一代腺病毒包裝系統(tǒng)包括1個含有缺失了E1/E3基因的腺病毒基因組序列的轉(zhuǎn)移質(zhì)粒（Transfer plasmid）和1個表達E1基因的包裝細胞（adenoviral E1-expressing cell line），其包裝流程是通過內(nèi)切酶PacI將攜帶目的基因（Gene of Interest，簡稱GOI）的轉(zhuǎn)移質(zhì)粒線性化。線性化的質(zhì)粒DNA隨后轉(zhuǎn)染到包裝細胞中，E1基因的表達產(chǎn)物激活轉(zhuǎn)移質(zhì)粒上的腺病毒基因的表達（E3基因的缺失不影響腺病毒的包裝），產(chǎn)生重組腺病毒顆粒。此時生產(chǎn)出來的為粗制的腺病毒。 | 第1-6天 |
Virus amplification | 粗制的腺病毒再次轉(zhuǎn)導(dǎo)到在包裝細胞中進行擴增。 | 第7天 |
Concentration and purification | 對于非純化的腺病毒，腺病毒可以被細胞直接分泌到培養(yǎng)基中，然后進行收集。對于超純化腺病毒，則還需要進一步的氯化銫（CsCl）密度梯度離心進一步純化和濃縮。 | 第24天 |
Quality Control | 對于每一個我們生產(chǎn)的腺病毒，質(zhì)量控制均包括基于免疫細胞化學(xué)染色（ICC）的滴度測定（Titer determination）、微生物（細菌和真菌）檢測（Bioburden test）和支原體檢測（Mycoplasma test）。 若轉(zhuǎn)移載體同時編碼一個熒光蛋白，我們還會將病毒進行細胞轉(zhuǎn)導(dǎo)以測定相應(yīng)的熒光表達情況（Transduction test）。此外，對于超純化腺病毒，我們還可以檢測內(nèi)毒素水平（Endotoxin test）。 | 第28天及以后 |
滴度保證
我們的滴度保證僅適用于包裝進病毒的區(qū)域（從5’ ITR 到3’ ITR）小于腺病毒承載限度（38.7 kb，~野生型HAd5基因組長度36 kb的108%）的載體。超過該范圍，超出的那部分序列在包入衣殼時會被剪切掉，導(dǎo)致包裝出來的腺病毒顆粒含有不完整的genome。此外，對于如下載體，我們同樣不能保證滴度:
- 包含對包裝過程有不利影響的序列，例如毒性基因（如促凋亡基因）；破壞包裝細胞或病毒的完整性（如導(dǎo)致細胞聚集的膜蛋白）的基因 ；易于重排或者產(chǎn)生二級結(jié)構(gòu)的序列（如重復(fù)序列或者高GC含量序列）。
- ?戶提供的載體，因為我們無法控制載體質(zhì)量。
客戶提供載體
如需客戶提供腺病毒載體，則請按照外來物品接收指南將載體寄送給我們。請嚴格按照我們的指南來進行裝運以免造成物品的任何延誤和損壞。客戶提供的所有材料均需經(jīng)過QC檢測，每一份材料附加檢測費用。請注意，客戶提供物品接收并通過QC之后生產(chǎn)才正式開始。
交付周期
周期是指訂單接受到發(fā)貨之間的時間。不包括需要客戶提供任何物料（如病毒載體）的等待時間。
視頻
暫無
文檔
使用說明書
腺病毒體外應(yīng)用
腺病毒體內(nèi)應(yīng)用
COA
常見問題解答
| 慢病毒 | MMLV | 腺病毒 | AAV |
| 組織嗜性 | 廣泛 | 廣泛 | hAd5只感染表達CAR受體的細胞 | 取決于血清型 |
| 是否可感染非分裂細胞 | 是 | 否 | 是 | 是 |
| 病毒基因組穩(wěn)定整合抑或游離于宿主基因組 | 穩(wěn)定整合 | 穩(wěn)定整合 | 游離的DNA附加體形式 | 游離的DNA附加體形式 |
| 自定義啟動子 | 是 | 否 | 是 | 是 |
| 應(yīng)用 | 細胞培養(yǎng)和體內(nèi)實驗 | 細胞培養(yǎng)和體內(nèi)實驗 | 體內(nèi)實驗 | 體內(nèi)實驗 |
| 體內(nèi)免疫反應(yīng) | 低 | 低 | 高 | 非常低 |
對于腺病毒，我們測量的是功效滴度（Functional titer）。在293A細胞中轉(zhuǎn)導(dǎo)梯度稀釋的腺病毒后，我們采用基于免疫化學(xué)的方法對轉(zhuǎn)導(dǎo)成功的細胞進行計數(shù)來代表病毒滴度。這些細胞包含了腺病毒特異性六連體蛋白（Ad5 hexon protein），并且每個細胞被看作一個感染單位。細胞在非常低的感染復(fù)數(shù)的條件下被轉(zhuǎn)導(dǎo)，以保證每個細胞只被一個腺病毒感染。這種實驗方法與傳統(tǒng)的噬菌斑試驗有良好的相關(guān)性。對于超純化的腺病毒，我們通過測定病毒顆粒的光密度（OD260）來換算為滴度（光密度與病毒的功效滴度有良好的相關(guān)性）。
相關(guān)服務(wù)
服務(wù)商工作站 >>
