在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，利用常規(guī)轉(zhuǎn)染將質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)到哺乳動(dòng)物細(xì)胞中是使用最廣泛的方法。雖然近年來(lái)開(kāi)發(fā)了不少更為先進(jìn)的基因?qū)胼d體系統(tǒng)（如慢病毒載體、腺病毒載體、AAV載體和piggyBac等），但常規(guī)質(zhì)粒基因表達(dá)載體仍被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室使用，這主要得益于其在技術(shù)上的簡(jiǎn)便性以及在各種類型細(xì)胞中的高效轉(zhuǎn)染率。常規(guī)質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染的關(guān)鍵特點(diǎn)是短暫性，并且在宿主基因組中的整合效率非常低（通常小于1%）。

關(guān)于常規(guī)質(zhì)?；虮磉_(dá)載體的更多信息，請(qǐng)參考以下文獻(xiàn)。

我們的載體系統(tǒng)已經(jīng)過(guò)優(yōu)化，其在大腸桿菌中具有高拷貝復(fù)制能力，且對(duì)細(xì)胞具有高效轉(zhuǎn)染率。根據(jù)用戶選擇的篩選標(biāo)記基因，可對(duì)轉(zhuǎn)染了該載體的細(xì)胞進(jìn)行篩選或者可視化追蹤。

技術(shù)簡(jiǎn)單：常規(guī)轉(zhuǎn)染即可把質(zhì)粒轉(zhuǎn)入細(xì)胞，相比起病毒載體需要進(jìn)行病毒包裝，過(guò)程更簡(jiǎn)單。

載體容量非常大：我們的載體總?cè)萘靠蛇_(dá)30 kb，其中質(zhì)粒骨架只占3 kb，有足夠大的容量可以放置客戶所感興趣的序列。

高水平表達(dá)：常規(guī)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，可以產(chǎn)生非常高的拷貝數(shù)（每個(gè)細(xì)胞多達(dá)幾千拷貝），使外源基因能高水平表達(dá)。

載體DNA非整合型：常規(guī)質(zhì)粒在細(xì)胞里主要以游離DNA狀態(tài)存在，所以常規(guī)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染也稱為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染。然而，質(zhì)粒DNA也可以以非常低的概率永久整合到宿主基因組中（質(zhì)粒轉(zhuǎn)染每10²~10⁶個(gè)細(xì)胞可能會(huì)有一個(gè)細(xì)胞的基因組被整合，整合效率取決于細(xì)胞類型）。如果將攜帶了藥物抗性基因或者熒光標(biāo)記基因的載體轉(zhuǎn)到細(xì)胞中，在經(jīng)過(guò)擴(kuò)大和傳代培養(yǎng)后，可以使用藥物篩選或細(xì)胞分選來(lái)獲得穩(wěn)定整合了該載體的細(xì)胞。

可轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型受限：不同類型細(xì)胞的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率差異很大。非分裂細(xì)胞比分裂細(xì)胞更難轉(zhuǎn)染，原代細(xì)胞比永生化細(xì)胞系更難轉(zhuǎn)染。一些重要的細(xì)胞類型更是難以轉(zhuǎn)染，如神經(jīng)元和胰島β細(xì)胞。另外，質(zhì)粒轉(zhuǎn)染局限于體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，很少運(yùn)用到活體實(shí)驗(yàn)。

基因拷貝數(shù)在不同細(xì)胞中呈現(xiàn)差異性：盡管成功的轉(zhuǎn)染可以在單個(gè)細(xì)胞里產(chǎn)生非常高的拷貝數(shù)，但不同細(xì)胞間卻有高度的差異性。在一些細(xì)胞中，質(zhì)?？截悢?shù)非常高，而在另外一些細(xì)胞卻是低拷貝甚至沒(méi)有。而病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)更傾向于相對(duì)均勻地把基因轉(zhuǎn)到細(xì)胞中。

Promoter: The promoter that drives your gene of interest is placed here.

Kozak: Kozak consensus sequence. It is placed in front of the start codon of the ORF of interest because it is believed to facilitate translation initiation in eukaryotes.

ORF: The open reading frame of your gene of interest is placed here.

SV40 late pA: Simian virus 40 late polyadenylation signal. It facilitates transcriptional termination of the upstream ORF.

CMV promoter: Human cytomegalovirus immediate early promoter. It drives the ubiquitous expression of the downstream marker gene.

Marker: A drug selection gene (such as neomycin resistance), a visually detectable gene (such as EGFP), or a dual-reporter gene (such as EGFP/Neo). This allows cells transduced with the vector to be selected and/or visualized.

BGH pA: Bovine growth hormone polyadenylation. It facilitates transcriptional termination of the upstream ORF.

pUC ori: pUC origin of replication. Plasmids carrying this origin exist in high copy numbers in E. coli.

Ampicillin: Ampicillin resistance gene. It allows the plasmid to be maintained by ampicillin selection in E. coli.