MSCV(Murine stem cell virus)逆轉(zhuǎn)錄病毒載體是?種有效的轉(zhuǎn)基因?具,能在胚胎?細(xì)胞、胚胎癌細(xì)胞、造??細(xì)胞和其他?種哺乳動物細(xì)胞系中穩(wěn)定表達(dá)外源基因。MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的5’ LTR經(jīng)過精?設(shè)計,采?來?于??細(xì)胞PCMV病毒的序列,能激活外源基因在多能?細(xì)胞中的表達(dá),從?克服了MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒在?細(xì)胞中基因沉默的問題。我們開發(fā)出?系列專有技術(shù)和試劑,從病毒滴度、純度、活性以及?致性等??顯著提升了MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝?藝?平。
訂購信息
生產(chǎn)規(guī)格 | 總量 | 最小滴度 | 分裝 | 價格(CNY) | 周期 |
MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒?量制備 | >2.5x106 TU | >107 TU/ml | 10x25 ul | ¥3,180.00 | 6-12天 |
MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒中量制備 | >107 TU | >107 TU/ml | 10x100 ul | ¥4,680.00 |
MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒大量制備 | >108 TU | >108 TU/ml | 10x100 ul | ¥7,780.00 |
超純化MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒?量制備 | >108 TU | >108 TU/ml | 10x100 ul | ¥11,880.00 |
服務(wù)詳情
病毒類型
我們提供以VSV-G假病毒化的MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝服務(wù)。
交付內(nèi)容
| 非純化MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒制備服務(wù) | 純化MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒制備服務(wù) |
交付內(nèi)容 | 定制病毒,按照規(guī)格交付: - ?量制備:>107TU/ml,10x25 ul
- 中量制備:>107TU/ml,10x100 ul
- ?量制備:>108TU/ml,10x100 ul
| 定制病毒,按照規(guī)格交付: |
對照病毒,按照定制病毒的規(guī)格對應(yīng)贈送: - ?量制備:>107TU/ml,100 ul
- 中量制備:>107TU/ml,2x100 ul
- ?量制備:>107TU/ml,2x100 ul
| 對照病毒,按照定制病毒的規(guī)格對應(yīng)選購: |
Polybrene(5 mg/ml,200 ul),贈送 | Polybrene(5 mg/ml,200 ul),贈送 |
病毒重懸液 | HBSS緩沖液 | HBSS緩沖液 |
運(yùn)輸/存儲 | 干冰/-80°C,避免反復(fù)凍融 | 干冰/-80°C,避免反復(fù)凍融 |
推薦應(yīng)用 | 體外培養(yǎng)細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo) | 體外培養(yǎng)細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)、動物體內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo) |
對照病毒
為了更好地開展您的實(shí)驗(yàn),我們按照“對照病毒與定制病毒的生物學(xué)應(yīng)用相匹配”的原則給您贈送或者推薦對照病毒。例如,如果定制病毒表達(dá)一個基因,則推薦的對照病毒表達(dá)熒光蛋白EGFP。推薦的對照病毒信息如下表所示:
對照病毒 | 對照載體名稱 | 對照載體ID | 定制病毒 |
EGFP對照MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒, Puro抗性 | pMSCV[Exp]-EGFP/Puro | VB010000-9311qyq | 哺乳動物基因表達(dá)MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒、哺乳動物非編碼RNA表達(dá)MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒 |
運(yùn)輸/儲存
我們的MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒存儲在HBSS緩沖液中,并采用干冰運(yùn)輸。收到病毒后,立即放置于-80℃,長期貯存至少6個月。MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒的保質(zhì)期約為一年。請避免反復(fù)凍融,因?yàn)檫@會導(dǎo)致病毒滴度大幅下降。
生產(chǎn)/質(zhì)控
步驟 | 描述 | 時間 |
Co-transfection | 我們常規(guī)使用的MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝系統(tǒng)包括1個轉(zhuǎn)移質(zhì)粒(Transfer plasmid)、1個膜蛋白表達(dá)質(zhì)粒(Envelope plasmid)、1個包裝質(zhì)粒(Packaging plasmid),將這些質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染包裝細(xì)胞。包裝質(zhì)粒分別為Gag/Pol表達(dá)質(zhì)粒。 | 第1天 |
Supernatant collection | 在細(xì)胞里,轉(zhuǎn)移質(zhì)粒轉(zhuǎn)錄出攜帶目的基因(Gene of Interest,簡稱GOI)的MSCV RNA基因組,與包裝質(zhì)粒表達(dá)出的衣殼結(jié)構(gòu)蛋白、酶、調(diào)控蛋白組裝成病毒顆粒后,轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),形成包膜病毒分泌到胞外。膜蛋白質(zhì)粒表達(dá)的VSV-G膜蛋白錨定在細(xì)胞膜上,隨著病毒成熟,與細(xì)胞膜一起成為了病毒的膜。細(xì)胞短暫孵育后,收集上清,離心去除細(xì)胞碎片并過濾。 | 第3天 |
Concentration and purification | PEG濃縮病毒顆粒。對于超純化MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒(體內(nèi)應(yīng)用級別),采用蔗糖離心方法進(jìn)一步純化、濃縮病毒。 | 第4天 |
Quality Control | 對病毒進(jìn)行滴度測定(Titer determination)、微生物檢測(Bioburden test,針對細(xì)菌、真菌)、支原體檢測(Mycoplasma test)等。 若轉(zhuǎn)移載體同時編碼一個熒光蛋白,我們還會將病毒進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)以測定相應(yīng)的熒光表達(dá)情況(Transduction test)。此外,對于超純化MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒,我們還可以檢測內(nèi)毒素水平(Endotoxin test)。 | 第5天及以后 |
滴度保證
我們的滴度保證僅適用于包裝進(jìn)病毒的區(qū)域(從5’ LTR的R元件的第一個堿基到3’ LTR的R元件的最后一個堿基)小于MSCV逆轉(zhuǎn)錄病毒承載限度(8 kb)的載體。超過該范圍,載體也許會被包裝進(jìn)病毒,但會造成病毒滴度降低。此外,對于如下載體,我們同樣不能保證滴度:
- 包含對包裝過程有不利影響的序列,例如毒性基因(如促凋亡基因);破壞包裝細(xì)胞或病毒的完整性(如導(dǎo)致細(xì)胞聚集的膜蛋白、含有polyA信號序列)的基因;易于重排或者產(chǎn)生二級結(jié)構(gòu)的序列(如重復(fù)序列或者高GC含量序列)。
- 用戶提供的載體,因?yàn)槲覀儫o法控制載體質(zhì)量。
交付周期
交付周期是指訂單接收到發(fā)貨之間的時間,不包括需要客戶提供任何物料(如病毒載體)的等待時間。
客戶提供載體
如需客戶提供MSCV病毒載體,則請按照外來物品接收指南將載體寄送給我們。請嚴(yán)格按照我們的指南來進(jìn)行裝運(yùn)以免造成物品的任何延誤和損壞??蛻籼峁┑乃胁牧暇杞?jīng)過QC檢測,每一份材料附加檢測費(fèi)用。請注意,客戶提供物品接收并通過QC之后生產(chǎn)才正式開始。
視頻
暫無
文檔
暫無
COA
常見問題解答
| 慢病毒 | MSCV | 腺病毒 | AAV |
組織嗜性 | 廣泛 | 廣泛,常用于感染ES、EC 和HS 細(xì)胞 | hAd5只感染表達(dá)CAR受體的細(xì)胞 | 取決于血清型 |
是否可感染非分裂細(xì)胞 | 是 | 否 | 是 | 是 |
病毒基因組穩(wěn)定整合抑或游離于宿主基因組 | 穩(wěn)定整合 | 穩(wěn)定整合 | 游離的DNA附加體形式 | 游離的DNA附加體形式 |
自定義啟動子 | 是 | 否 | 是 | 是 |
應(yīng)用 | 細(xì)胞培養(yǎng)和體內(nèi)實(shí)驗(yàn) | 細(xì)胞培養(yǎng)和體內(nèi)實(shí)驗(yàn) | 體內(nèi)實(shí)驗(yàn) | 體內(nèi)實(shí)驗(yàn) |
體內(nèi)免疫反應(yīng) | 低 | 低 | 高 | 非常低 |
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