莫洛尼氏鼠白血病逆轉(zhuǎn)錄病毒（Moloney murine leukemia retrovirus，簡稱MMLV）是第一個被廣泛使用的基因轉(zhuǎn)移載體，并且是第一個使用ex vivo策略治療遺傳性疾病的載體（R.M. Blaese 1995）。使用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的優(yōu)勢之一是載體基因組永久整合到宿主基因組中，可長期穩(wěn)定地表達轉(zhuǎn)基因。MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒只能感染分裂的細胞，主要原因是它們無法穿過核膜，只能在細胞分裂過程中通過不完整的核膜來完成感染。MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒的生產(chǎn)需要在一個包裝細胞中，從單獨的包裝質(zhì)粒中反式表達病毒Gag、Pol和Env蛋白。我們開發(fā)出一系列專有技術和試劑，從病毒滴度、純度、活性以及一致性等方面顯著提升了逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝工藝水平。
| 生產(chǎn)規(guī)格 | 總量 | 最小滴度 | 分裝 | 價格（CNY） | 周期 |
| MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒?量制備 | >2.5x106 TU | >107 TU/ml | 10x25 ul | ￥3,180.00 | 6-12天 |
| MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒中量制備 | >107 TU | >107 TU/ml | 10x100 ul | ￥4,680.00 | |
| MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒大量制備 | >108 TU | >108 TU/ml | 10x100 ul | ￥7,780.00 | |
| 超純化MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒?量制備 | >108 TU | >108 TU/ml | 10x100 ul | ￥11,880.00 |
我們提供2種逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝服務：
| 非純化MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒制備服務 | 純化MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒制備服務 | |
| 交付內(nèi)容 | 定制病毒，按照規(guī)格交付：
| 定制病毒，按照規(guī)格交付：
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對照病毒，按照定制病毒的規(guī)格對應贈送：
| 對照病毒，按照定制病毒的規(guī)格對應選購：
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| 聚凝胺（Polybrene，5 mg/ml，200 ul），贈送 | 聚凝胺（Polybrene，5 mg/ml，200 ul），贈送 | |
| 病毒重懸液 | HBSS緩沖液 | HBSS緩沖液 |
| 運輸/存儲 | 干冰/-80°C，避免反復凍融 | 干冰/-80°C，避免反復凍融 |
| 推薦應用 | 體外培養(yǎng)細胞轉(zhuǎn)導 | 體外培養(yǎng)細胞轉(zhuǎn)導、動物體內(nèi)細胞轉(zhuǎn)導 |
對照病毒
為了更好地開展您的實驗，我們按照“對照病毒與定制病毒的生物學應用相匹配”的原則給您贈送或者推薦對照病毒。例如，如果定制病毒表達一個基因，則推薦的對照病毒表達熒光蛋白EGFP。推薦的對照病毒信息如下表所示：
| 對照病毒 | 對照載體名稱 | 對照載體ID | 定制病毒 |
| EGFP對照MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒， Puro抗性 | pMMLV[Exp]-EGFP/Puro | VB010000-9307ddn | 哺乳動物基因表達MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒、哺乳動物非編碼RNA表達MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒 |
| EGFP對照自失活MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒， Puro抗性 | pMMLV-SIN[Exp]-MSCV>EGFP/Puro | VB010000-9478ycv | 自失活MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒 |
我們的MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒存儲在HBSS緩沖液中，并采用干冰運輸。收到病毒后，立即放置于-80℃，長期貯存至少6個月。MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒的保質(zhì)期約為一年。請避免反復凍融，因為這會導致病毒滴度大幅下降。
| 步驟 | 描述 | 時間 |
Co-transfection | 我們常規(guī)使用的MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝系統(tǒng)包括1個轉(zhuǎn)移質(zhì)粒（Transfer plasmid）、1個膜蛋白表達質(zhì)粒（Envelope plasmid）、1個包裝質(zhì)粒（Packaging plasmid），將這些質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染包裝細胞。包裝質(zhì)粒為Gag/Pol表達質(zhì)粒。 | 第1天 |
Supernatant collection | 在細胞里，轉(zhuǎn)移質(zhì)粒轉(zhuǎn)錄出攜帶目的基因（Gene of Interest，簡稱GOI）的MMLV RNA基因組，與包裝質(zhì)粒表達出的衣殼結(jié)構(gòu)蛋白、酶、調(diào)控蛋白組裝成病毒顆粒后，轉(zhuǎn)運到細胞膜內(nèi)側(cè)，形成包膜病毒分泌到胞外。膜蛋白質(zhì)粒表達的VSV-G膜蛋白錨定在細胞膜上，隨著病毒成熟，與細胞膜一起成為了病毒的膜。細胞短暫孵育后，收集上清，離心去除細胞碎片并過濾。 | 第3天 |
Concentration and purification | PEG濃縮病毒顆粒。對于超純化MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒（體內(nèi)應用級別），采用蔗糖離心方法進一步純化、濃縮病毒。 | 第4天 |
Quality Control | 對病毒進行滴度測定（Titer determination）、微生物檢測（Bioburden test，針對細菌、真菌）、支原體檢測（Mycoplasma test）等。 若轉(zhuǎn)移載體同時編碼一個熒光蛋白，我們還會將病毒進行細胞轉(zhuǎn)導以測定相應的熒光表達情況（Transduction test）。此外，對于超純化MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒，我們還可以檢測內(nèi)毒素水平（Endotoxin test）。 | 第5天及以后 |
我們的滴度保證僅適用于包裝進病毒的區(qū)域（從5’ LTR的R元件的第一個堿基到3’ LTR的R元件的最后一個堿基）小于MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒承載限度（8 kb，～野生型MMLV逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組長度）的載體。超過該范圍，載體也許會被包裝進病毒，但會造成病毒滴度降低。此外，對于如下載體，我們同樣不能保證滴度：
交付周期是指訂單接收到發(fā)貨之間的時間，不包括需要客戶提供任何物料（如病毒載體）的等待時間。
如需客戶提供MMLV病毒載體，則請按照外來物品接收指南將載體寄送給我們。請嚴格按照我們的指南來進行裝運以免造成物品的任何延誤和損壞?？蛻籼峁┑乃胁牧暇杞?jīng)過QC檢測，每一份材料附加檢測費用。請注意，客戶提供物品接收并通過QC之后生產(chǎn)才正式開始。
暫無
使用說明書
| 慢病毒 | MMLV | 腺病毒 | AAV | |
| 組織嗜性 | 廣泛 | 廣泛 | hAd5只感染表達CAR受體的細胞 | 取決于血清型 |
| 是否可感染非分裂細胞 | 是 | 否 | 是 | 是 |
| 病毒基因組穩(wěn)定整合抑或游離于宿主基因組 | 穩(wěn)定整合 | 穩(wěn)定整合 | 游離的DNA附加體形式 | 游離的DNA附加體形式 |
| 自定義啟動子 | 是 | 否 | 是 | 是 |
| 應用 | 細胞培養(yǎng)和體內(nèi)實驗 | 細胞培養(yǎng)和體內(nèi)實驗 | 體內(nèi)實驗 | 體內(nèi)實驗 |
| 體內(nèi)免疫反應 | 低 | 低 | 高 | 非常低 |
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