桿狀病毒（Baculovirus）被廣泛用于在昆蟲細(xì)胞中生產(chǎn)大量重組蛋白，因其具有以下優(yōu)點(diǎn)：（1）適當(dāng)?shù)姆g后修飾，因?yàn)槔ハx細(xì)胞是高等真核生物；（2）病毒基因組比較大，約130 kb，因此具有多個(gè)基因或大插入片段的高容量；（3）生物安全性高，因?yàn)橐吧鷹U狀病毒不會(huì)感染人類；（4）強(qiáng)啟動(dòng)子Polyhedrin或p10驅(qū)動(dòng)的蛋白產(chǎn)量非常高。我們開發(fā)出一系列專有技術(shù)和試劑，從病毒滴度、純度、活性以及一致性等方面顯著提升了桿狀病毒包裝工藝水平。
訂購(gòu)信息
| 生產(chǎn)規(guī)格 | 總量 | 最小滴度 | 分裝 | 價(jià)格（CNY） | 周期 |
| 昆?桿狀病毒中量制備 | >106 PFU | >106 PFU/ml | 10x100 ul | ￥4,680.00 | 15-22天 |
| 昆?桿狀病毒?量制備 | >107 PFU | >107 PFU/ml | 10x100 ul | ￥7,780.00 | 22-29天 |
服務(wù)詳情
病毒類型
我們提供的昆蟲桿狀病毒類型為AcMNPV毒株（Autographa californica multicapsid nucleopolyhedrovirus）。
交付內(nèi)容
| 桿狀病毒病毒制備服務(wù) |
| 交付內(nèi)容 | 定制病毒，按照規(guī)格交付： 中量制備：>106PFU/ml，10x100 ul ?量制備：>107PFU/ml，10x100 ul |
對(duì)照病毒，按照定制病毒的規(guī)格對(duì)應(yīng)贈(zèng)送： 中量制備：>106PFU/ml，2x100 ul ?量制備：>106PFU/ml，2x100 ul |
| 病毒重懸液 | DPBS緩沖液 |
| 運(yùn)輸/存儲(chǔ) | 干冰/-80°C，避免反復(fù)凍融 |
| 推薦應(yīng)用 | 昆蟲細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo) |
對(duì)照病毒
為了更好地開展您的實(shí)驗(yàn)，我們按照“對(duì)照病毒與定制病毒的生物學(xué)應(yīng)用相匹配”的原則給您贈(zèng)送或者推薦對(duì)照病毒。例如，如果定制病毒表達(dá)一個(gè)基因，則推薦的對(duì)照病毒表達(dá)熒光蛋白EGFP。推薦的對(duì)照病毒信息如下表所示：
| 對(duì)照病毒 | 對(duì)照載體名稱 | 對(duì)照載體ID | 定制病毒 |
| EGFP對(duì)照桿狀病毒 | pBV-EGFP | VB010000-9305vtu | 哺乳動(dòng)物基因表達(dá)桿狀病毒 |
運(yùn)輸/儲(chǔ)存
我們的桿狀病毒存儲(chǔ)在DPBS緩沖液中，并采用干冰運(yùn)輸。收到病毒后，立即放置于-80℃，長(zhǎng)期貯存至少6個(gè)月。桿狀病毒放置于-20℃可保存一周。請(qǐng)避免反復(fù)凍融，因?yàn)檫@會(huì)導(dǎo)致病毒滴度大幅下降。
生產(chǎn)/質(zhì)控
| 步驟 | 描述 | 時(shí)間 |
Transformation into E. coli cells | 將攜帶目的基因（Gene of Interest， 簡(jiǎn)稱GOI）和Tn7轉(zhuǎn)座位點(diǎn)的轉(zhuǎn)移載體（Transfer vector）轉(zhuǎn)化到特定大腸桿菌里，此菌株含有一個(gè)表達(dá)Tn7轉(zhuǎn)座酶的輔助質(zhì)粒（helper plasmid）和一個(gè)含有桿狀病毒基因組序列的大質(zhì)粒（即bacmid，約136 kb，在桿狀病毒序列中有Tn7轉(zhuǎn)座位點(diǎn)）。在該細(xì)菌里，轉(zhuǎn)移載體上的目的基因轉(zhuǎn)座到bacmid上，形成攜帶目的基因的重組bacmid。 | 第1天 |
Transfection into insect cells | 重組bacmid經(jīng)過檢測(cè)且序列無誤后，將重組bacmid質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染昆蟲Sf9細(xì)胞。此時(shí)包裝出來的為粗制的桿狀病毒。 | 第4天 |
Virus amplification | 病毒擴(kuò)增：使用粗制的桿狀病毒再次感染包裝細(xì)胞，從而擴(kuò)大病毒產(chǎn)量。 | 第9天 |
Virus purification | 從培養(yǎng)上清中收集病毒顆粒。對(duì)于大規(guī)格包裝，采用蔗糖離心進(jìn)一步濃縮。 | 第14天 |
Quality Control | 我們采用基于qPCR的方法測(cè)定昆蟲桿狀病毒的滴度。 對(duì)于每一個(gè)我們生產(chǎn)的桿狀病毒，質(zhì)量控制均包括滴度測(cè)定（Titer determination）、微生物（細(xì)菌和真菌）檢測(cè)（Bioburden test）、支原體檢測(cè)（Mycoplasma test）。若轉(zhuǎn)移載體同時(shí)編碼一個(gè)熒光蛋白，我們還會(huì)將病毒進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)以測(cè)定相應(yīng)的熒光表達(dá)情況（Transduction test）。 | 第15天及以后 |
交付周期
交付周期是指訂單接收到發(fā)貨之間的時(shí)間，不包括需要客戶提供任何物料（如病毒載體）的等待時(shí)間。
客戶提供載體
如需客戶提供桿狀病毒載體，則請(qǐng)按照外來物品接收指南將載體寄送給我們。請(qǐng)嚴(yán)格按照我們的指南來進(jìn)行裝運(yùn)以免造成物品的任何延誤和損壞。客戶提供的所有材料均需經(jīng)過QC檢測(cè)，每一份材料附加檢測(cè)費(fèi)用。請(qǐng)注意，客戶提供物品接收并通過QC之后生產(chǎn)才正式開始。
視頻
暫無
文檔
使用說明書
Baculovirus for In Vitro Applications
COA
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